高壓滅菌鍋在微生物試驗中的操作指導

高壓滅菌鍋中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。
我們要知道，滅菌溫度應是一個溫度范圍，而不是一個固定值。通常高壓蒸汽滅菌溫度是一個固定值，如試管斜面培養基和搖瓶液體培養基的滅菌要求為：121℃，20min，但在121℃只是滅菌溫度的下限，實際的滅菌溫度在121℃-124℃（或123℃）之間波動。如果是自動控溫型滅菌鍋，設定好滅菌溫度下限為121℃后，當溫度升到124℃（或123℃）時，自動斷電停止加熱，當溫度降到121℃時，自動開始加熱；如果是手動控溫型滅菌鍋，當溫度升到124℃時，手動切斷電源停止加熱，當溫度降到121℃時，手動接通電源開始加熱。
高壓滅菌鍋在微生物試驗中的操作說明：
1.首先將內層滅菌桶取出，再向外層鍋內加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。
2.放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。
3.加蓋并將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。
4.用電爐或煤氣加熱，并同時打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內的冷空氣。待冷空氣完全排盡后，關上排氣閥，讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內壓力升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。
5.滅菌所需時間到后，切斷電源或關閉煤氣，讓高壓滅菌鍋內溫度自然下降，當壓力表的壓力降至0時，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時，打開排氣閥，就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養基由于內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養基而發生污染。
6.將取出的滅菌培養基放入37℃溫箱培養24小時，經檢查若無雜菌生長，即可待用。

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